本书是全球输血医学领域备受推崇的免疫血液学方法大全，至今已经更新到第4版，一直在输血医学领域广泛使用。全书分15章，内容包括同种和自身抗体的检测、高频率抗体检测、孕妇产前抗体检测、抗体特异性鉴定、酶处理红细胞、试剂红细胞、吸附放散技术，药物诱导性溶血，以及细胞分离技术和ABO疑难血型鉴定等技术。对每项技术都有操作程序、结果判断、试剂配制、注意事项、避免假阴性和假阳性结果的技术要点等描述，涵盖几乎全部免疫血液学方法。
1900 年ABO 血型的发现，不仅使输血成为一种安全的医疗救治手段，而且诞生了专门研究人类血型的免疫血液学这门学科。血型匹配是安全输血的第一要素，所以说只要有输血就有血型问题。ABO 和所有其他血型都是使用免疫血液学方法所鉴定，至今已经发现45个血型系统，380 多个血型抗原。虽然在20 世纪末，随着整个生物医学领域进入基因组时代，允许在分子水平上预测血型的基因型，但是血型的定义和鉴定，仍然以免疫血液学方法作为金标准。
2021 年，美国血库协会将AABB 全称更改为Association for the Advancement of Blood& Biotherapies（血液与生物治疗促进会），以履行更广泛的使命。2021 年末，国际亚太血型与基因组学协会开始以丛书形式翻译出版AABB 出版物，以便国内读者借鉴国际输血医学领域的知识和经验。在AABB 出版委员会的全力支持下，丛书的第一部《免疫血液学分子检测标准》已于2023 年初由人民卫生出版社出版发行。本书为丛书的第二部，中文译本书名定为《免疫血液学方法（第4 版）》，原版书名为Judds Methods in Immunohematology（4thEdition）。
十年磨一剑，Judds Methods in Immunohematology 这把剑磨了35 年。从1988 年的第1版问世以来，已经改版4 次。1994 年出第2 版；2008 年，第3 版；2022 年为第4 版。篇幅从最初的288 页增长到500 页，然后到667 页，再到如今的719 页（英文原版页数）。
《免疫血液学方法（第4 版）》有15 章，其内容包括同种和自身抗体的检测、高频率抗体检测、孕妇产前抗体检测、抗体特异性鉴定、酶处理红细胞、试剂红细胞、吸附放散技术，药物诱导性溶血，以及细胞分离技术和ABO 疑难血型鉴定等技术。对每项技术都有操作程序、结果判断、试剂配制、注意事项、避免假阴性和假阳性结果的技术要点等描述，涵盖几乎全部免疫血液学方法。内容也随着免疫血液学的发展得以更新，不仅全面系统，而且还愈加翔实丰富。原著作者对技术背景的描述，涉及免疫诊断基本原理的方方面面，娓娓道来，让读者在免疫血液学的世界里遨游，沉浸其中，忘记了周围的一切。
翻译出版这部专著，对于中国输血领域读者也许有特殊的意义。中国的免疫血液学研究起步较晚，尚无免疫血液学方法学专著。虽然近年来中国学者在ABO 和Rh 等血型基因位点上检测出数以百计的新等位基因，但是在目前被正式命名的红细胞血型抗原中，没有一个血型是在中国人群中发现的。率先发现中国人血型已经成为中国学者面对的一个挑战，此刻出版这本国际知名的免疫血液学方法学方面的专著，对于发现中国人血型、填补国家空白将有所助益。
原著介绍免疫血液学方法非常全面，采用独特的描述方式，便于读者理解和实验室操作。在翻译中，我们力求本地化，使译文符合国人的语言习惯。鉴于时间仓促，知识和能力有限，本译稿难免有疏漏之处，还望广大读者批评指正。
宝剑锋从磨砺出，译者本着求真务实的精神，从静谧的午夜，到东方的一缕晨曦，精雕细琢，孜孜不倦。终于在金秋十月，译稿完成。就让我们共同启封，一起领略免疫血液学的风采！
高宏军 赵桐茂
2023 年10 月18 日
任江苏省诺贝尔奖得主蒂姆亨特研究院研究员，负责血型基因检测新型试剂、芯片检测技术和大数据分析、人类血型数据库的建设工作。卫健委血型基因检测联合参比（江阴）实验室主任。亚太血型与基因组学协会(IAABG) 委员。国际输血协会（ISBT）会员和大会代表。美国血库协会（AABB）会员。
第1 章 常规试管法 / 1
1-A. ABO 定型和RhD 分型 / 2
1-B. 意外抗体检测：LISS 添加剂程序 / 6
1-C. LISS 抗球蛋白交叉配血 / 9
1-D. 弱D 检测程序 / 12
1-E. 立即离心交叉配血 / 16
1-F. 血清学反应分级和评分 / 19
1-G. 实验室内能力测试：IAT 判读和分级程序 / 21
第2 章 抗体检测 / 26
2-A. 白蛋白添加/ 分层检测 / 27
2-B. 白蛋白抗球蛋白检测 / 29
2-C. 酶IAT 检测 / 32
2-D. LIP IAT 检测 / 36
2-E. LISS 洗涤IAT 检测 / 40
2-F. LISS 无花果蛋白酶IAT 检测 / 43
2-G. 聚乙二醇IAT 检测 / 47
2-H. 直接凝集法检测冷反应性抗体 / 50
2-I. 生理盐水IAT 检测 / 53
第3 章 酶技术 / 56
3-A. 用菠萝蛋白酶一步法检测抗体 / 58
3-B. 用- 胰凝乳蛋白酶处理红细胞 / 60
3-C. 用无花果蛋白酶一步法检测抗体 / 63
3-D. 用无花果蛋白酶处理红细胞 / 65
3-E. 用神经氨酸酶处理红细胞（T- 活化） / 68
3-F. 用木瓜蛋白酶一步法检测抗体 / 70
3-G. 用木瓜蛋白酶处理红细胞 / 72
3-H. 用链霉蛋白酶处理红细胞 / 75
3-I. 用胰蛋白酶（粗酶）处理红细胞 / 78
3-J. 用胰蛋白酶（纯化酶）处理红细胞 / 81
3-K. 用ZZAP 处理红细胞 / 84
第4 章 放散技术 / 86
4-A. 放散前洗涤 / 87
4-B. 使用氯仿放散抗体 / 89
4-C. 用氯仿/ 三氯乙烯放散抗体 / 92
4-D. 用柠檬酸放散抗体 / 95
4-E. 用冷甘氨酸放散抗体 / 98
4-F. 从基质中放散抗体 / 101
4-G. 用醚放散抗体 / 104
4-H. 冻融法放散抗体（Lui 法） / 107
4-I. 冻融法放散抗体（Wiener 法） / 109
4-J. 热放散抗体 / 112
4-K. 用二氯甲烷放散抗体 / 114
4-L. 用微波放散抗体 / 117
4-M. 放散来自胎盘组织的抗体 / 119
4-N. 使用超声放散抗体 / 121
4-O. 用二甲苯/D- 柠檬烯放散抗体 / 123
4-P. 使用EDTA- 甘氨酸-HCl 从细胞上解离IgG / 126
4-Q. 使用二磷酸氯喹从细胞中解离IgG / 128
第5 章 细胞分离方法 / 131
5-A. 通过直接离心收集自身红细胞 / 132
5-B. 使用邻苯二甲酸酯收集自身红细胞 / 134
5-C. 使用Percoll 程序进行细胞分离 / 137
5-D. 在血红蛋白S 或镰状细胞病中收集自身红细胞 / 140
5-E. 用抗体分离混合细胞群体 / 142
5-F. 单个核细胞分离程序 / 145
第6 章 检测抗体的其他血清学方法 / 147
6-A. 凝胶：制备缓冲凝胶柱 / 149
6-B. 凝胶：制备抗-IgG 柱 / 152
6-C. 凝胶：使用缓冲凝胶柱检测抗体 / 155
6-D. 凝胶：使用抗-IgG 柱检测抗体 / 157
6-E. 凝胶：调整预填充的中性缓冲柱，用于小鼠IgG 抗体 / 159
6-F. 凝胶：调整预填充的抗-IgG 柱，用于改良的PEG-IAT / 162
6-G. 微孔板：ABO 定型和RhD 分型程序 / 165
6-H. 微孔板：使用LISS 程序检测抗体 / 169
6-I. 微孔板：LIP 技术程序 / 172
6-J. 毛细管：盐水凝集程序 / 174
6-K. 毛细管：白蛋白单层程序 / 176
6-L. 毛细管：白蛋白双层程序 / 178
6-M. 毛细管：木瓜蛋白酶一步法程序 / 180
6-N. 毛细管：无花果蛋白酶一步法程序 / 182
6-O. 毛细管：预包被红细胞上的IAT 程序 / 184
6-P. 毛细管：预包被IAT 程序 / 186
第7 章 试剂红细胞（非酶处理）/ 194
7-A. 制备C3b/C4b 包被的红细胞 / 196
7-B. 用食糖制备C3b/C4b 包被的红细胞 / 198
7-C. 制备IgM/C3b 包被的红细胞/ 200
7-D. 制备C3b 包被的红细胞：Fruitstone 法 / 203
7-E. 制备C4b 包被的红细胞/ 205
7-F. 制备IgA 和IgM 包被的红细胞 / 207
7-G. 制备IgG 包被的红细胞 / 210
7-H. 处理红细胞：AET 程序 / 212
7-I. 处理红细胞：0.2M DTT 程序 / 214
7-J. 灭活S 抗原：次氯酸钠处理 / 216
7-K. 冰冻红细胞：甘油保存和回收 / 218
7-L. 冰冻红细胞：液氮保存和回收 / 220
第8 章 抗体鉴定 / 223
8-A. 单个或多个抗体的鉴定 / 224
8-B. 管理有冷凝集素的样品和患者 / 231
8-C. 谱细胞结果评估：排除 / 234
8-D. 精选细胞过程 / 236
8-E. 选择抗原阴性的血液输血 / 238
8-F. 确定概率水平 / 241
8-G. 酸化血清 / 244
8-H. 使用吸附放散联合程序 / 245
8-I. 检测胰蛋白酶抗性NVG 受体 / 248
8-J. 在抑制程序中使用可溶性血型物质 / 250
8-K. 用DIDS 抑制缗钱状凝集 / 252
8-L. 鉴定抗-Nform / 254
8-M. 通过两阶段EDTA-IAT 检测补体固定抗体 / 256
第9 章 高频率抗原的抗体 / 260
9-A. 用混合血浆或血清抑制抗体 / 266
9-B. 鉴定抗-Ch/Rg：快速程序 / 268
9-C. 识别HLA 决定簇的抗体 / 270
9-D. 使用同种异体C4 吸附抗-Ch/Rg / 272
9-E. 使用2mol/L 尿素筛选/ 确认Jk（ab）红细胞 / 275
第10 章 产前和围产期检测 / 277
10-A. 妊娠期检查 / 282
10-B. Rh 免疫球蛋白给药 / 284
10-C. 分娩时胎儿和新生儿溶血病的评估 / 287
10-D. 产前抗体滴定程序 / 289
10-E. 通过吸附放散试验区分抗-G 和抗-C 抗-D / 292
10-F. 在母亲RhD 阴性样品中筛查胎儿RhD 阳性红细胞 / 295
10-G. 用酶联抗球蛋白试验定量抗-D / 298
10-H. 大量胎母输血的筛查（改良的Kleihauer-Betke 酸放散试验） / 302
10-I. 用酶联抗球蛋白试验量化胎母输血 / 305
10-J. 分光光度法分析羊水 / 309
10-K. 处理被华通胶污染的脐带血 / 312
第11 章 研究含有自身抗体的样品 / 314
11-A. 免疫性溶血和/ 或DAT 阳性病例的调查 / 318
11-B. 抗球蛋白试验：抗-IgG 和抗-C3 直接试验（试管法） / 322
11-C. 抗球蛋白试验：抗-IgM 和抗-IgA 直接试验（试管法） / 325
11-D. 抗球蛋白试验：抗-IgM 和抗-IgA 直接检测（柱凝集试验） / 327
11-E. 抗球蛋白试验：使用聚凝胺的直接试验 / 329
11-F. 抗球蛋白试验：酶联DAT / 332
11-G. 分散自身凝集 / 335
11-H. 检测冷反应性自身抗体的热振幅 / 337
11-I. 冷反应性自身抗体滴定法诊断试验（过夜法）/ 339
11-J. 通过滴定法检测冷反应性自身抗体 / 341
11-K. 通过滴定确定冷反应性自身抗体的特异性 / 343
11-L. 用自身红细胞吸附冷反应性自身抗体 / 345
11-M. 用异源（兔）红细胞吸附冷自身抗体 / 347
11-N. 用Donath-Landsteiner 试验检测PCH / 349
11-O. 通过滴定法测定温反应性自身抗体的RH 相关特异性 / 352
11-P. 用酶处理的自身红细胞吸附温反应性自身抗体 / 354
11-Q. 用ZZAP 处理的自身红细胞吸附自身抗体 / 357
11-R. 用ZZAP 处理的自身红细胞吸附自身抗体（微量法） / 360
11-S. 用同种异体红细胞吸附温反应性自身抗体 / 363
11-T. 评估同种异体吸附血清结果：画线排除 / 366
11-U. 预热的间接抗球蛋白试验 / 370
第12 章 研究药物诱导溶血 / 373
12-A. 将药物溶解在溶液中 / 381
12-B. 准备尿液以检测代谢物依赖性抗体 / 385
12-C. 检测与药物处理红细胞反应的药物依赖性抗体 / 387
12-D. 检测半合成青霉素的抗体 / 391
12-E. 检测头孢噻吩依赖性抗体 / 394
12-F. 检测存在药物时发生反应的药物依赖性抗体 / 396
12-G. 检测存在药物时发生反应的代谢物依赖性抗体 / 400
第13 章 研究ABO 定型问题 / 404
13-A. 混合视野反应研究 / 412
13-B. ABO 定型反应不一致的研究 / 414
13-C. 评估ABO 定型不一致 / 416
13-D. 使用蛋白酶处理红细胞进行ABO 定型的解析 / 418
13-E. 通过吸附和热放散确认弱A 或弱B 抗原表达 / 420
13-F. 通过吸附和冻融放散法（Lui 法）确认弱A 或弱B 抗原表达 / 423
13-G. 检测次要红细胞群和ABO 混合物 / 426
13-H. 确定ABH 分泌型状态 / 428
13-I. 测定H 抗原的表达 / 430
13-J. 分离A∶O 混合物 / 432
13-K. 通过O 型红细胞的转化检测A 和B 转移酶 / 434
13-L. 预热的ABO 反定型 / 436
13-M. 选择含有高效价抗-A 和/ 或抗-B 的血浆 / 438
第14 章 研究红细胞多凝集 / 440
14-A. 用AB 血清和脐带血血清检测多凝集 / 442
14-B. 制备外源凝集素粗提物 / 444
14-C. 制备鼠尾草凝集素粗提物 / 447
14-D. 制备纯化的外源凝集素溶液 / 450
14-E. 用聚凝胺聚集红细胞 / 452
14-F. 乙酰化红细胞 / 454
14-G. 抑制获得性B 的反应性 / 457
14-H. 用酸化抗-B 检测红细胞 / 459
第15 章 其他方法 / 461
15-A. 检测PNH：酸溶血试验（哈姆试验） / 462
15-B. 检测HEMPAS：改良的酸溶血试验（哈姆试验） / 465
15-C. 将IgG 抗体转化为直接凝集素 / 467
15-D. 使用51Cr 标记的红细胞评估红细胞存活率 / 469
15-E. 使用0.01M DTT 区分IgM 和IgG 抗体 / 472
15-F. 使用2-ME 区分IgM 和IgG 抗体 / 475
15-G. 使用酶联抗球蛋白试验做剂量研究 / 478
15-H. 使用单核细胞单层试验预测临床意义 / 481
15-I. 筛查PNH：蔗糖溶血试验 / 484
15-J. 将血浆转化为血清 / 486
15-K. 从外周血中分离基因组DNA / 488
15-L. 使用热启动Taq PCR 扩增基因组DNA / 490
15-M. 制备琼脂糖凝胶和电泳分析PCR 产物 / 493
附录/ 495
附录A. 试剂制备和储存/ 496
附录B. 试剂制备存档表 / 515
国际亚太血型与基因组学协会简介/ 516
缩写词/ 517
索引/ 521
读者反馈/ 534
图8-A-1. 调查意外抗体时的注意事项 / 226
图8-A-2. 调查自身对照阳性血液样品时的注意事项 / 227
图8-C-1. 在每个单独的谱细胞上划掉的抗原 / 235
图8-C-2. 在抗原谱表的顶部划掉的抗原 / 235
图9-1. 高频率抗原抗体的研究（敏感性见表9-2） / 265
图10-B-1. Rh 免疫球蛋白给药流程图 / 286
图13-1. 调查ABO 定型不一致流程图 / 411
表1-D-1. 抗-D 直接和间接试验的解释建议 / 15
表1-F-1. 血清学反应分级 / 20
表8-A-1. 某些红细胞抗原同种抗体的血清学特征 / 228
表8-E-1. 选择抗原阴性的血液输血：常见抗体的一些实例 / 240
表8-F-1. 概率值 / 243
表8-J-1. 血型物质的抗体抑制作用/ 251
表9-1. 木瓜蛋白酶/ 无花果蛋白酶和硫醇试剂对高频率红细胞抗原抗体反应的影响 / 262
表9-2. 酶和化学品对抗体与高频率红细胞抗原反应的影响 / 263
表11-1. 冷反应性自身抗体的特异性：与未处理的O、I 红细胞的反应比较 / 317
表12-1. 报告引起免疫性溶血和DAT 阳性的药物 / 376
表13-1. ABO 定型不一致的原因 / 409
表13-2. 一些异常或不寻常的ABO 定型结果 / 410
表14-1. 多凝集性红细胞与外源凝集素的反应 / 441
表15-A-1. 酸溶血试验程序 / 464
表15-E-1. 用2-ME 或DTT 研究确定免疫球蛋白抗体类别的解读 / 474
附录6-1. Sephadex 凝胶珠：背景信息 / 189
附录6-2. 凝胶柱中的凝集反应 / 190
图、表和章附录
附录6-3. 微孔板试验：一般注意事项 / 191
附录6-4. 毛细管方法：一般注意事项 / 193
附录8-1. 评估抗体鉴定谱细胞初始结果 / 258
附录8-2. 鉴定/ 确认抗体特异性的方法 / 259
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