本教材根据普通高等医药院校生物化学与分子生物学教学大纲的要求,针对生物化学与分子生物学所涉及的主要内容进行编写。全书共分四部分,第一部分为基本实验技术(含分光光度法、离心技术、电泳技术和层析技术),第二部分为生物化学实验(含21个实验),第三部分为分子生物学实验(含7个实验),第四部分为综合性实验和设计性实验(含2个实验)。每个实验包括目的要求、实验原理、主要材料与试剂、主要器材、操作步骤、注意事项、思考题七部分,具有较强的实用性和可操作性。
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目录
第一篇 基本实验技术 1
第一章 常用仪器使用技术 1
第二章 分光光度法 7
第三章 离心技术 13
第四章 电泳技术 21
第五章 层析技术 29
第二篇 生物化学实验 37
实验须知 37
实验一 蛋白质的沉淀反应 40
实验二 蛋白质的等电点 44
实验三 核糖核酸的提取及成分鉴定 46
实验四 影响酶作用的因素 48
实验五 麦芽淀粉酶的提取和鉴定 54
实验六 维生素C的定量测定 56
实验七 饱食、饥饿对肝糖原含量的影响 61
实验八 血糖的测定 63
实验九 胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响 71
实验十 剧烈运动对尿中乳酸含量的影响 73
实验十一 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 77
实验十二 脂肪酸β-氧化与酮体的生成和利用 79
实验十三 血清蛋白乙酸纤维素薄膜电泳 83
实验十四 血清丙氨酸转氨酶活性的测定 86
实验十五 血浆二氧化碳结合力测定 92
实验十六 茯苓多糖、猪苓多糖的水解和鉴定 94
实验十七 标准曲线及回收实验 96
实验十八 氨基酸的薄层层析法 98
实验十九 胡萝卜素的柱层析分离法 101
实验二十 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) 103
实验二十一 兔血清白蛋白的提取与鉴定 111
第三篇 分子生物学实验 113
实验一 分子生物学实验须知和基本操作技术 113
实验二 真核生物基因组DNA的提取 115
实验三 基因组DNA的酶切与鉴定 119
实验四 聚合酶链反应(PCR) 123
实验五 Southern印迹法 126
实验六 Northern印迹法 129
实验七 Western印迹法 133
第四篇 综合性实验和设计性实验 138
实验一 基于中医“肾阳虚证”蛋白差异表达分析的虚拟仿真实验 138
实验二 瘦素基因的鉴定和分析 142
附表 实验开题报告 145