《体内药物分析》共16章,遵循科学性、先进性和实用性相结合的基本原则,将教材内容分为四个模块:第1~3章为绪论、前处理技术和方法建立与评价;第4~9章为体内药物分析中各种分析技术介绍;第10~15章是体内药物分析方法在药物研究的不同领域中的应用;第16章为体内药物分析实验。书后附有药名、专有名词中英文索引,便于读者查找。
第1章 绪论
1.1 体内药物分析的性质与意义
1.1.1 体内药物分析的性质
1.1.2 体内药物分析的意义
1.2 体内药物分析的对象与特点
1.2.1 体内药物分析的对象
1.2.2 体内药物分析的特点
1.3 体内药物分析的任务
1.3.1 分析方法学研究
1.3.2 分析方法在相关领域中的应用
1.4 体内药物分析方法与进展
1.4.1 体内药物分析方法
1.4.2 体内药物分析进展
1.5 体内药物分析课程学习要求
第2章 常用生物样品与预处理技术
……
第3章 体内药物分析方法的建立与方法评价
第4章 高效液相色谱法与液质联用技术
第5章 气相色谱法与气质联用技术
第6章 毛细管电泳法及其与质谱联用技术
第7章 手性色谱法
第8章 免疫分析法
第9章 其他分析方法
第10章 体内药物分析方法在药代动力学研究中的应用
第11章 体内药物分析方法在治疗药物监测中的应用
第12章 体内药物分析方法在药物代谢与药物-药物相互作用研究中的应用
第13章 体内药物分析方法在药物代谢酶的遗传多态性研究中的应用
第14章 体内药物分析方法在体内内源性物质分析中的应用
第15章 体内药物分析方法在滥用药物、临床毒物、兴奋剂检测中的应用
第16章 体内药物分析实验
中英文索引
5.其他样品的采集与制备 (1)组织匀浆:采用颈椎脱位、断头法、化学物质或药物法处死动物(用于体外代谢试验时,不能用化学品或药物处死动物,以免影响药物代谢酶的活性和含量),快速切下所需组织,加适量水或其他适宜溶剂,洗去多余的血和表面污染物。吸干水分,用剪刀把组织剪碎,进行匀浆,然后在匀浆液中加适宜有机溶剂和/或用酸碱调整溶液pH,以提取药物,经离心除去蛋白质,分取有机层进行后续处理。组织匀浆最好当天使用,否则,应将其冷冻保存。(2)肝微粒体制备:以鼠肝微粒体(rat hepatic microsomes)的制备为例。动物末次给药8h后开始禁食,禁食16h后,将动物断头处死,剖腹,用注射器吸取经冰浴冷却的生理盐水,经胸动脉或门静脉注入肝脏,灌流,除去肝中血液。快速取出肝脏(以下均在4℃以下操作),用冰冷的生理盐水(或0.25mol/L蔗糖溶液)洗净,滤纸吸干水分,称重,加入四倍于肝重量的0.25mol/L冰冷的蔗糖溶液,用剪刀把肝脏剪碎,制成匀浆。于9000r/min低温离心15~20min,取上清液再于19000r/min低温离心20min,分取上清液。根据实验室条件,选择以下任一种方法制敢微粒体。超速离心法:将上述上清液于100000r/min低温离心45min,弃去上清液,在沉淀中加pH7.4的0.Imol/L Tris—缓冲液(含0.15mol/L KC1)混匀,100000r/min低温离心30min后,沉淀用冰冷的0.25mol/L蔗糖溶液冲洗3次,取沉淀物,加pH7.4的50mmol/L Tris—蔗糖(或0.1mol/L Tris)缓冲液适量制成微粒体悬浮液(使蛋白质浓度约为20mg/mL),测定微粒体悬浮液中蛋白质浓度,于—30℃下保存备用。钙沉淀法:在上述上清液中加入CaCl2溶液,按1mL上清液加0.ImL 88mmol/L CaCl2溶液的比例将两液混合,置冰浴中5min,时而振摇,然后于27000r/min低温离心15~20min,除去上清液,在沉淀物中加入pH7.4的0.1mol/L Tris—缓冲液(含0.15mol/L KCI)混匀,27000r/min低温离心30min后,取沉淀物,加pH7.4的50mmol/L Tris—蔗糖(或0.Imol/LTris)缓冲液适量制成微粒体悬浮液(使蛋白质浓度约为20mg/mL),测定微粒体悬浮液中蛋白质浓度,于—30℃下保存备用。钙沉淀法是利用微粒体能在钙离子作用下聚集成团的原理,采用较低的离心速度获得聚集的微粒体颗粒,无需低温超速离心机。