本教材着重突出“基础理论、基本技能、基本技术”和“学生创新能力”的培养。在此基础上，针对生物技术专业的特点，主要进行了“以提高科研技能为重点、以创新为目的”的实践技能教学改革。本教材汇集优质师资力量，融合生物化学、分子生物学、蛋白质工程、酶学的理论和一些实验技术的优势，较全面地介绍了各种技能的原理，更重要的是，可使学生通过大实验较好地掌握分子生物学、基因工程、蛋白质工程、酶学等技术，为学生掌握基础研宄和临床研宄的重要技术打下很好的基础。
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目录
第一篇 绪论
第一章 常用仪器设备及基本实验技术 1
第一节 显微镜的结构和使用方法 1
第二节 离心机的基本原理与使用方法 6
第三节 分光光度计与酶标仪 10
第四节 电泳仪 15
第五节 PCR仪 26
第六节 发酵罐 29
第二篇 基础性实验
第二章 细胞生物学实验 32
实验一 细胞培养常用器皿的清洗及消毒 32
实验二 细胞的形态结构 36
实验三 细胞化学 39
实验四 细胞吞噬活动的观察 42
实验五 细胞的亚显微结构 43
实验六 细胞的无丝分裂与有丝分裂 45
实验七 细胞的减数分裂 47
第三章 生物化学实验 51
实验八 Folin-酉分试剂法（Lowiy法）测定蛋白质浓度 51
实验九 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清乳酸脱氢酶同工酶 52
实验十 过氧化氢酶Km的测定 55
实验十一 血清清蛋白的分离及电泳鉴定 58
实验十二 激素对血糖浓度的影响 61
实验十三 细胞DNA的分离提取、成分鉴定及含量测定 64
实验十四 消化三大营养物质的酶活性测定设计与试验 71
第四章 生物技术实验 74
实验十五 哺乳动物细胞RNA提取及电泳鉴定 74
实验十六 反转录PCR（RT-PCR） 78
实验十七 质粒DNA提取及鉴定 81
实验十八 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） 84
实验十九 Western blot蛋白质印迹法 87
实验二十 MTT法检测细胞活性 94
实验二十一 真核细胞转染 95
实验二十二 免疫荧光染色 98
实验二十三 免疫组织化学染色 99
第三篇 综合性实验
实验二十四 胶体金验孕诊断试剂盒制备及效果评价 102
实验二十五 口腔上皮细胞基因组DNA提取及beta-actin基因扩增 105
实验二十六 细胞培养技术 108
实验二十七 细胞凋亡的形态学观察 115
实验二十八 流式细胞仪检测细胞凋亡——AnnexinV/PI双染色法 117
实验二十九 细胞凋亡过程中染色体DNA片段的测定（DNA ladder测定） 119
实验三十 ELISA法对癌症标志物-甲胎蛋白（AFP）的含量测定 121
实验三十一 实时定量PCR检测细胞中miR-21表达 123
实验三十二 双转染报告系统检测 126
实验三十三 石蜡包埋切片免疫组化检测TIMP3蛋白定位及表达 128
实验三十四 免疫荧光染色检测miR-21高表达对上皮细胞间质化的影响 130
实验三十五 彗星实验检测细胞DNA损伤 131
实验三十六 离子交换层析分离混合氨基酸 133
实验三十七 凝胶过滤分离蛋白质 135
实验三十八 亲和层析法分离豌豆凝集素 137
实验三十九 苯丙氨酸解氨酶的纯化及活性测定 138
实验四十 增强型绿色荧光蛋白真核表达载体的构建和表达 141
实验四十一 脂肪酶的重组表达及纯化 144
实验四十二 固定化酵母细胞蔗糖酶活力测定 146
实验四十三 噬菌体的分离及效价测定 148
实验四十四 细菌营养缺陷型菌株的诱变和筛选鉴定 150
实验四十五 微生物培养、保种 153
实验四十六 培养基的配制与灭菌 159
实验四十七 斑马鱼胚胎红细胞活体染色 160
实验四十八 斑马鱼软骨染色观察 162
实验四十九 斑马鱼中囊胚转换前后胰岛素蛋白的表达差异 163
实验五十 绿色荧光蛋白mRNA的体外转录与显微注射 164
第四篇 设计性试验
范例一 葵瓜子壳和花生壳制备活性炭及其吸附性能的比较 172
范例二 大蒜素的提取及探究其抗凝血作用 179
范例三 探究油菜籽中原花青素提取的最佳条件及对自由基的清除效果 185
第五篇 虚拟仿真实验
参考文献206
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